Mutacje w NR5A1 związane z niewydolnością jajników ad 5

Jej kariotyp miał wartość 46, XX, a diagnozą była niewydolność jajników (tabela 1). Analiza genu NR5A1 ujawniła heterozygotyczną delecję 9-bp w ramce, która powoduje utratę trzech aminokwasów (p.Leu231_Leu233del) w regionie N-końcowym domeny wiążącej ligand (Figura 2 i Figura 3A). W analizie in silico przewidziano zmianę hydrofobowości helisy domeny wiążącej ligand, co może skutkować zmienioną konformacją białka lub funkcją (Figura 3B). Nie zaobserwowano delecji w 800 allelach kontrolnych, w tym w próbkach od 69 nie dotkniętych chorobą osób pochodzenia romskiego i 56 osobników nie dotkniętych chorobą z populacji gudżarati w Indiach. Druga dziewczynka pochodząca z Afryki Zachodniej (Senegalu), w wieku 4 miesięcy z przerostem łechtaczki (Tabela 1). Dziecko, urodzone przez nieobowiązkowych rodziców, miało podwyższony poziom hormonu folikulotropowego, co wskazuje na niewydolność jajników. Analiza genu NR5A1 ujawniła dwie blisko powiązane mutacje heterozygotyczne – c.368G . C (p.Gly123Ala) i c.386C . T (p.Pro129Leu) – w domenie zawiasowej białka (ryc. 2 i ryc. Dodatek dodatkowy). Trawienie enzymatyczne amplikonu ujawniło, że obie mutacje były obecne na tym samym chromosomie (dane nie pokazane). DNA jej rodziców było niedostępne do badań. Nie obserwowano mutacji u 479 nieobjętych kontrolą osób (113 Senegalczyków, 111 innych mieszkańców Afryki Zachodniej, 100 mieszkańców Afryki Północnej, 27 Afrykanów z Afryki Południowej lub Wschodniej i 128 innych osób).
Nie zaobserwowaliśmy żadnych innych niesynonimowych wariantów w NR5A1 w żadnej z czterech rodzin. Obydwie osoby, u których wystąpiła sporadyczna pierwotna niewydolność jajników, były homozygotyczne pod względem polimorfizmu p.Gly146Ala (c.437G . C), który wcześniej wykazano, że ma około 80% aktywności białka typu dzikiego.35 Aby dalej oceniać stopień zmienność genetyczną, zsekwencjonowaliśmy otwartą ramkę odczytu NR5A1 u 140 osobników z prawidłowymi poziomami plemników (> 20 x 106 plemników na mililitr), z których 46 spłodziło co najmniej jedno dziecko. W tym panelu wykryliśmy poprzednio scharakteryzowaną p.Gly146Ala jako jedyną niesynonimiczną zmianę (częstotliwości alleliczne, G 0,843 i C 0,157).
Funkcjonalne testy aktywności NR5A1
Figura 4. Figura 4. Testy aktywności transkrypcyjnej NR5A1. Aktywność transkrypcyjną NR5A1 typu dzikiego (SF1) i wariantów związanych z niewydolnością jajników badano przy użyciu promotorów Cyp11a1 (Panel A) i Cyp19a1 (Panel B) w komórkach tsa201. Aktywność NR5A1 jest pokazana jako wzrost czynnika powyżej linii podstawowej, który jest zdefiniowany jako aktywność obserwowana w transfekcji pustym wektorem. Dane przedstawiają średnią z trzech niezależnych eksperymentów, z których każdy przeprowadza się w trzech powtórzeniach. Paski T reprezentują błędy standardowe.
Zaobserwowaliśmy ilościową redukcję transaktywacji zarówno CYP11A1, jak i CYP19A1 podczas testowania wpływu każdej z mutacji NR5A1 na funkcję białka, z wykorzystaniem embrionalnych komórek nerki tsa201 (Figura 4A i 4B). Białka z mutacjami p.Pro129Leu, c.666delC i p.Leu231_Leu233del wykazały poważną utratę aktywacji, podczas gdy mutant p.Gly123Ala wykazywał aktywność bardziej podobną do białka typu dzikiego. To odkrycie pokazuje, że wariant p.Pro129Leu jest patologiczny u pacjenta, który przenosi oba warianty
[hasła pokrewne: xenna extra opinie, nebu dose opinie, sinlac cena ]

Powiązane tematy z artykułem: nebu dose opinie sinlac cena xenna extra opinie